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哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度？
2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指準確復制目的模板的結果。具體來說，這涉及到多個步驟，包括讀取模板鏈，選擇正確的三磷酸核苷，并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區分正確和錯誤的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸，并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶，以保證目的DNA的忠實復制。在設計PCR實驗時，你首先要考慮你的應用是否需要高保真聚合酶。如果實驗結果依賴于正確的DNA序...
如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產品質量受損?
2020-08-24 胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。血清是細胞培養中用量大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，常用于動物細胞的體外培養，具有極為重要的功能。如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時，血清中的各種蛋...
溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具
2020-06-27 溶酶體染色試劑盒對于懸浮細胞，取10～60萬細胞，重懸于0.5mL細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅加入0.5mLJC-1染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中37℃孵育20分鐘。在孵育期間，按照每1mLJC-1染色緩沖液（5×）加入4mL蒸餾水的比例，配制適量的JC-1染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。37℃孵育結束后，600g4℃離心3～4分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具，用來標記亞細胞，細胞器；例如細胞膜、溶酶體、...
細胞培養中馬血清的作用有哪些
2020-06-19 馬血清采自健康馬血液為原料，封閉系統內無菌采血，微孔過濾而成，性狀為澄清液體，無噬菌體、超低內毒素，無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等，促細胞生長繁殖效果佳，適用于細胞、組織器官培養、細胞株保藏、單抗研制，是醫院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養基之一。細胞在單純的培養基中不能存活，在特殊類型的細胞培養中必須提供某些營養物質和生長因子才能是細胞得以生長并維持生長狀態?；A培養基常常要添加血清，血清終濃度多為5－20％。特殊用途的血清來源需用經驗確定。廣泛應用的...
說一說胎牛血清在細胞培養研究中的重要作用
2020-05-18 胎牛血清采用心臟封閉穿刺的方法采自孕6～8月孕齡的健康母牛腹中的胎牛。通過生物材料合成吸附技術和低溫進行前期處理，去除細菌、病毒、支原體、抗體等影響血清質量的因素，然后再在凈化車間中進行過濾分裝。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要說為什么很多細胞培養的科研人都用到胎牛血清，那就不得不說說胎牛血清那極為重要的作用。1.提供維持細...
ELISA常見的組織樣本制備方法
2020-05-15 為了保證ELISA實驗數據的可靠性，在收集標本前都必須有一個完整的計劃。我們提倡新鮮樣品應盡早檢測，對收集后一周內檢測的樣本，及時儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集樣本，在取材后講標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰箱與室溫有一定溫差，蛋白容易降解，直接影響實驗質量，故應避免反復凍融。不同的樣本請根據實際情況處理。樣品制備方法1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再...
血清中的沉淀物對細胞培養有什么影響？
2020-04-26 細胞生長，我們的試驗以及經驗表明沉淀物不會影響細胞培養，我們的客戶以及其它血清生產商也證明了這一點。過濾，如果血清中出現大量的沉淀物，血清將很難過濾。一般說來，因為在血清生產時后已經經過100nm或者40nm的過濾處理，并且經過了嚴格的無菌檢測，因此不推薦再過濾用于細胞培養的血清。在實驗室中沒有必要再過濾處理血清，在大規模的細胞培養中往往將血清直接加到培養基中一起過濾。污染，磷酸鈣往往被誤認為微生物污染而引起爭端。研究者可能會在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會比較警覺的去...
外泌體在胃癌發生發展中的作用與研究
2020-04-16 外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體*于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運...

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